Темнов А.В., Сирота Т.В., Ставровская И.Г., Кондрашова М.Н.
Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, 142292, Пущино Московской области, Россия, E-mail: [email protected]
Проблема самоорганизации биологических структур применительно к энергетическому обмену клетки связана, в частности, с малоизученными аспектами перемещения митохондрий внутри клетки. Этот процесс зависит от уровня функциональной активности клетки и доступности различных видов энергетических субстратов. В литературе обсуждаются вопросы перемещения митохондрий к структурам, которые в данный момент наиболее активно потребляют энергию (ядро клетки), либо сосредоточение митохондрий вокруг источника субстрата (липидные включения). Сосредоточение и ассоциация митохондрий ставят вопрос о взаимовлиянии митохондрий и необходимости их изучения как единого целого.
При исследовании природы и механизмов действия отрицательных аэроионов (ОАИ), нами впервые было обнаружено, что воздействие ОАИ приводит к усилению образования ассоциатов митохондрий, характерных для активно функционирующих и неповрежденных тканей.
Морфометрический анализ микроизображений суспензий митохондрий и гомогенатов тканей (без применения методов фиксации), позволил количественно оценить этот процесс. Это открывает широкие возможности изучения биофизических и лечебных аспектов воздействия аэроионов на морфологическом уровне. Источником ОАИ служила люстра Чижевского ЭЛИОН-131 М, АООТ "ДИОД", Москва, которая в процессе тихого разряда создавала 1,2 млн. отрицательных зарядов в см3. Получение митохондрий и гомогенатов тканей проводилось по разработанному нами методу, обеспечивающему сохранение их нативной структурной организации в ассоциаты. При помещении препаратов в раствор, предварительно выдержанный под источником ОАИ, наблюдается укрупнение ассоциатов. При прямым действием ОАИ на препарат в тонком слое жидкости этот процесс выражен ещё ярче, некоторые ассоциаты достигают огромной площади, значительно превышающей площадь клеток печени. В растворах, обработанных ОАИ, нами обнаружено образование 50-100 нМ перекиси водорода, которая по-видимому, спонтанно образуется при взаимодействии супероксида с водой. Степень ассоциации митохондрий зависит от физиологического состояния животного, состава среды выделения и внесения микроколичеств перекиси водорода. При хранении гомогената ткани степень ассоциации митоходрий носила двухфазный характер: 1 - возрастание в течение 70-100 мин., 2 - последующее снижение степени ассоциации. Микроколичество полиэтиленимина, (синтетического положительно заряженного полимера) вызывает значительное укрупнение ассоциатов. Внесение комплексообразующих реагентов (1мМ ЭДТА или 3мМ ЭГТА) резко снижает степень ассоциации. Природа сил, удерживающих митохондрии в ассоциатах, требует дальнейшего изучения. Можно предполагать, что наблюдаемое увеличение площади ассоциатов под действием ОАИ, в определенной степени связано с изменением величины заряда поверхности внешней мембраны митохондрий.